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上海气相色谱仪新技术下的改革
点击次数:1230 发布时间:2014-07-24
   上海气相色谱仪利用气相色谱层析技术做为微生物诊断的工具已成功地用于微生物的分类和鉴定。该法敏感性强,能够分离和检测到毫微克的水平。上海气相色谱仪具有快速的特点,常在数十分钟甚至数小时就可以对传染病做出早期诊断。其结果稳定,重复性好,但不足之处是操作中各因素不易控制,方法不易标化等。
  上海气相色谱仪的基本部件(层析柜)
  1.谱柱及加热炉色谱柱一般由金属或玻璃制成,通常采用的柱长2m~4m,内径2mm, 毛细管柱长度可达20m~150m,内径为0.2mm。
  2.载气上海气相色谱仪常用的载气主要有氮、氩、氢和二氧化碳等。这些气体一般都由高压气瓶供给。
  上海气相色谱仪载体一般采用惰性、多孔的固体颗粒。多由硅藻土或玻璃珠制成,分析不同极性的微生物化合物,为了获得zui适的分离条件,上海气相色谱仪要求有不同固定相的载体。目前比较常用的载体有:聚乙二醇(CarbOwax 20M)、F F A P(聚乙二醇20M和2-硝基对苯二甲酸的反应产物),OV—17(苯基甲基硅酮)。OV-210、SE-30(甲基硅酮)、Chromosorb G(白色硅藻土载体)等。上海气相色谱仪柱加热炉在温度控制上是非常重要的。
  3.上海气相色谱仪进样器可以用于分离固相、气相和液相标本。液相标本采用微升注射器穿过橡皮隔片注入,上海气相色谱仪气相标本采用特种气相注射器注入。
  4. 纪录仪
  5. 数据处理装置上海气相色谱仪一般均附有数据处理计算机。
  上海气相色谱仪试验条件的选择
  1.柱温选择上海气相色谱仪柱温选择对分离度影响很大,常是条件选择的关键。选择的基本原则是:在使zui难分离的组分有尽可能好的分离高度的前提下,上海气相色谱仪尽可能采取较低温度,但以保留时间适宜及不拖尾为度。
  ⑴ 高沸点混合物(200℃~400℃),若需在较低的柱温下分析,上海气相色谱仪可采用低固定液配比1%~3%,采用高灵敏检测器,柱温可比沸点低100℃~150℃,在200℃~250℃的柱温下分析。
                              上海气相色谱仪
  ⑵ 上海气相色谱仪沸点<300℃的样品,可用3%~25%固定液配比。沸点越低,所用配比越高,柱温可比平均沸点低50℃至平均沸点的范围选择。
  2.载体选择  载体采用低线速时,宜用氮气;高线速时用氢气。柱越长,上海气相色谱仪柱内有较大压力降,宜用氢气。载气采用低线速时为20ml~80ml/min。
  3.上海气相色谱仪色谱柱的选择  要注意极性及zui高使用温度,柱温不能超过zui高使用温度。上海气相色谱仪固定相按极性相似的原则选择。
  色谱柱的内径大小、长度都能影响分离率。一般而言,内径越小,长度越长,分离效果越好,上海气相色谱仪一般柱长为1m~5m(毛细管柱则20m~100m)。
  上海气相色谱仪填充剂颗粒一般采用40目~60目,60目~80目及80目~100目大小。上海气相色谱仪长柱子宜用粒度大些的,以减少柱压降,短柱子则用粒度细的。
  气相色谱中固定液的含量对分离效率的影响较大。上海气相色谱仪一般采用固定液与载体重量之比为15︰100~25︰100。采用高灵敏度的检测器,上海气相色谱仪由于进样量减少,固定液含量可以降至5︰100以下。这样可以使用较低柱温,从而提高柱效,缩短分析时间。上海气相色谱仪但固定液用量太少会引起吸附。
  4.上海气相色谱仪其它条件
  ⑴ 气化室温度及检测室温度选择:气化温度取决于样品的挥发性、沸点、稳定性以及进样量,一般选择稍高于样品沸点,上海气相色谱仪但不要超过沸点50%以上,以防分解。检测室温度需高于柱温,一般高于柱温30℃左右或与气化室同温。
  ⑵ 上海气相色谱仪进样量:固定相在配比15%~35%的层析柱时,zui大进样量液体为10μl,气体为10ml。一般样品量液体4μl,气体为0.5ml~3ml,固体小于1mg。
  ⑶ 上海气相色谱仪桥电位选择:散热多和选择大的桥电位,在灵敏度相同的情况下,应尽量选择低桥电位,上海气相色谱仪以保护热敏元件。
  上海气相色谱仪层析是一种分离分析的方法,因此上海气相色谱仪的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。
  1.定性上海气相色谱仪对于一已知范围的混合物,用此法定性很容易,但对于范围未知的混合物来说,上海气相色谱仪则需要配合化学分析及其它仪器分析等。
  ⑴ 利用保留值定性法:上海气相色谱仪同一种物质在一根层析柱上保留时间相同。取样品各可能组分的纯物质加入样品中,混合进样,对此上海气相色谱仪加入后的色谱图,若某色谱峰相对谱高,则该色谱峰的组分与纯物质可能为同一物质。
  ⑵ 化学反应定性法:即把色谱柱的流出物,上海气相色谱仪通过官能团试剂中,观察试剂的颜色是否发生变化或是否有沉淀,上海气相色谱仪而判断该组分含什么官能团或属于何类化合物。
  ⑶ 上海气相色谱仪两谱联用定性法:即利用质谱仪、红外分光光度计等来进行测定,定性。
  2.定量  在实验条件恒定时,峰面积或峰高与组分的含量成正比,因此可以利用峰面积或峰高面积或峰高来进行定量。上海气相色谱仪对于微生物标本的气相色谱分析常根据以下几点来进行比较。
  ⑴ 上海气相色谱仪峰的有无和峰的大小。
  ⑵ 按10个重复标本分析计算的平均t值(标准差)。
  ⑶ 同标准化合物的相对保留时间进行对比,上海气相色谱仪而对某化合物做出鉴定。
联系人:王先生
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