高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH 值或离子强度。对于复杂混合物，特别是保留性能相差较大的混合物，梯度洗脱是改进高效液相色谱仪分离效果的重要手段。
一、工作原理：
流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成，通过改变流动相中各溶剂组成的比例而改变流动相的极性、PH 值或离子强度，使每个流出的组分都有合适的容量因子，并使样品的所有组分在最短时间内实现最佳分离。
二、优点：
1、改善峰形，很少拖尾。
2、增加灵敏度，有利于痕量组分的检测。
3、提高分离能力。
4、缩短分析周期。
三、不足：
有时会引起基线漂移。
高效液相色谱仪的梯度洗脱与气相色谱仪的程序升温相似，后者改变的是温度。
